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中药补阳还五汤熏蒸治疗脑梗死机制的研究

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  方法选择41例脑梗死患者,在中药补阳还五汤熏蒸治疗前后分别采集血清进行双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测,比较治疗前后患者血清血管内皮生长因子(VEGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达水平,分析VEGF、BDNF表达水平之间的线性关系。
  结果治疗前后患者血清VEGF、BDNF表达水平差异有统计学意义(P<0.01),治疗后血清VEGF、BDNF表达水平显著高于治疗前。血清VEGF、BDNF表达水平相关不显著(P>0.05)。
  结论中药补阳还五汤熏蒸治疗可显著升高脑梗死患者血清VEGF、BDNF表达水平,提示其可能对脑梗死具有较好的治疗作用。
  【关键词】中药熏蒸;补阳还五汤;脑梗死
  中图分类号:R743.33文献标识码:ADOI:10.3969/j.issn.10031383.2017.02.007
  【Abstract】ObjectiveTo explore the molecular mechanism of treatment effect of Buyang Huanwu Decoction on cerebral infarction.
  Methods41 patients with cerebral infarction were selected,and double antibody sandwich enzymelinked immunosorbant assay(ELISA) was used to detect serums which were respectively collected before and after treatment.In addition,expression levels of vascular endothelial growth factor(VEGF) and brain derived neurotrophic factor(BDNF) were compared before and after treatment,and linear relationship between the expression levels of the VEGF and BDNF was analyzed.
  ResultsBefore and after treatment,difference of the expression levels of VEGF and BDNF was statistically significant(P<0.01),and after treatment,the expression levels of them were significantly higher than those before treatment.There was no significant correlation between the expression levels of serum VEGF and BDNF(P>0.05).
  ConclusionTraditional Chinese medicine Buyang Huanwu Decoction can significantly increase the expression levels of serum VEGF and BDNF in patients with cerebral infarction,which suggests that it may have a better therapeutic effect on cerebral infarction.
  【Key words】traditional Chinese medicine fumigation;Buyang Huanwu Decoction;cerebral infarction
  腦卒中主要分出血性和缺血性。我国现有脑卒中患者约700万例,其中缺血性脑卒中(即脑梗死)占比最高,约为80%[1],仅脑卒中治疗费用即约400亿元/年[2]。国内外对脑梗死进行了大量的研究,但治疗上仍未获得重大突破,目前仍没有确切的治疗方法来减轻神经损伤,多年来唯一被美国FDA 批准用于脑卒中的药物只有组织纤溶酶原激活剂(tPA)[3]。从我国传统中药材或复方中筛选多靶点药物是一个较好的研究方向,对于传统医药资源保护和攻克脑卒中均具有重要意义[4]。在使用西药的基础上联合口服或鼻饲中药补阳还五汤,能显著促进脑梗死患者的神经功能恢复[5]。近年来,采用中药熏蒸治疗脑卒中取得了良好的效果,但研究主要是对其疗效做局部机理的探讨,认识停留在宏观甚至仅仅限于推理。本研究使用中药补阳还五汤熏蒸法对脑梗死患者进行治疗研究,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测41例桂西地区缺血性脑卒中患者血液血管内皮生长因子(VEGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达水平,初步探讨中药熏蒸对脑卒中康复患者脑功能重组的影响情况及其康复机理。
  1对象与方法
  1.1研究对象
  选择2016年1月至10月在右江民族医学院附属医院康复医学科与神经内科住院患者41例,均符合全国第四届脑血管病学术会议制定的诊断标准,并经头颅CT或MRI检查确诊为缺血性脑卒中(脑梗死)。其中男23例,女18例,平均年龄(67.56±7.68)岁。
  1.2病例纳入与排除标准
  纳入标准:(1)初次发病,年龄30~80岁,经头颅CT或MRI证实,一侧偏瘫,病程<6个月;(2)无认知功能障碍;(3)日常生活活动能力量表Barthel(BI)指数>40分的病人;血压<170/95 mmHg;(4)无严重心肺等全身性疾病。排除标准:(1)严重言语、注意力、听觉、视觉、智力、精神或认知障碍(简明精神状态检查表MMSE<27分);(2)严重痉挛或疼痛;(3)骨关节肌肉疾患、其他严重神经系统疾病、恶性肿瘤和严重心肺肝肾损害等;(4)外地无法随访;(5)体内有金属异物;(6)酒精或药物成瘾等;(7)复发型脑卒中患者。 1.3方法
  1.3.1样本收集
  治疗前后24 h内于受试者肘正中静脉抽取3 ml空腹血置于促凝管中,促凝血分离血清后用于检测VEGF和BDNF水平。
  1.3.2熏蒸方法
  采用大连鹏达医疗器械有限公司SZ88II型多功能熏蒸治疗仪给予中药熏蒸患侧。水温控制在40℃,每日熏蒸1次,每次30 min。10次为1个疗程,共2个疗程。
  1.3.3中药熏蒸药方
  采用脑中风后遗症治疗方补阳还五汤,以黄芪益气,当归养血,合赤芍、川芎、红花、地龙活血化瘀通经通络。具体为:黄芪60 g,当归30 g,赤芍30 g, 红花30 g,川芎30 g,地龙30 g,桃仁30 g。
  1.3.4检测方法
  VEGF、BDNF的表达水平由ELISA法检测,ELISA试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供,并严格按照说明书进行操作。
  1.4统计学方法
  采用SPSS 17.0软件进行分析,计量资料以均数±标准差(〖AKx-D〗±s)表示,治疗前后变量的比较采用配对样本t检验,相关性运用Pearson相关分析法,检验水准:α=0.05,双侧检验。
  2结果
  2.1血清VEGF、BDNF標准品的OD值
  不同浓度梯度标准品的OD值,如表1所示。
  2.2治疗前后VEGF、BDNF的表达水平
  治疗后VEGF、BDNF的表达含量均明显高于治疗前的表达含量,差异有统计学意义(P<0.01),提示中药补阳还五汤熏蒸法可能对脑梗死具有较好治疗作用。见表2。
  2.3患者血清VEGF、BDNF表达水平的相关性
  经Pearson线性相关分析,患者血清VEGF、BDNF表达水平差异无统计学意义(r=0.171,P=0.286>0.05),提示患者血清VEGF、BDNF表达水平相关不显著。
  3讨论
  脑梗死是常见的脑血管病变,因其具有高发病率、高死亡率、高致残率的“三高”特点,一直以来都是临床治疗与研究的难点与热点[6]。国内外进行了大量的基础研究,发现血清VEGF、BDNF含量与大脑神经功能恢复关系密切,Jiang等[7]对脑梗死大鼠进行重复耳迷走神经刺激治疗,检测其BDNF和VEGF的表达水平,发现BDNF和VEGF含量显著升高,认为脑梗死后可能通过上调大鼠脑的BDNF和VEGF含量以实现神经保护作用。Atif等[8]研究黄体激素对小鼠脑梗死急性发作期BDNF、VEGF含量的影响,也发现黄体激素治疗后通过升高小鼠BDNF、VEGF含量,对梗死的小鼠大脑具有治疗作用。Alhusban等[9]研究发现坎地沙坦也是通过增加脑梗死大鼠血清VEGF、BDNF含量,从而促进大脑神经功能的恢复。此外,多项人体研究也均发现[10~11],在原治疗基础上加用补阳还五汤口服后可有效改善患者的神经功能及预后,病例组治疗效果显著优于对照组,但血清VEGF、BDNF含量改变情况有待进一步研究。
  然而,当前鲜见国内外采用中药补阳还五汤熏蒸治疗脑卒中的相关研究。因此,本研究以41例脑梗死患者作为研究对象,采用中药补阳还五汤熏蒸治疗,治疗前后采集患者血液样本,采用ELISA技术对血清VEGF、BDNF表达水平进行检测,初步探讨中药补阳还五汤熏蒸治疗脑梗死的分子机制。我们发现,脑梗死患者血清VEGF、BDNF表达水平在中药补阳还五汤熏蒸治疗后显著升高,提示中药补阳还五汤熏蒸法对脑梗死具有较好的治疗作用。同时,我们还分析了患者血清VEGF、BDNF表达水平的相关性,结果显示两者相关无显著性,可能因影响VEGF、BDNF表达水平的因素较多,机制较为复杂,也可能因样本量较小,有待进一步深入研究。此外,在临床操作过程中,因熏蒸疗程较长,患者每次均需脱掉衣服,偶有受凉感冒,且熏蒸过程中偏瘫患者偶有烫伤情况出现,考虑此可能为患者对中药熏蒸疗法的依从性偏低的主要原因。
  综上,中药补阳还五汤熏蒸治疗脑梗死,可明显升高VEGF、BDNF表达水平,对脑梗死具有治疗作用,但其具体机制有待进一步研究。随着分子生物学的发展,相信中药补阳还五汤熏蒸治疗脑梗死的机理将会得到更深入的发现,综合考虑脑梗死患者的各种危险因素[12],并借助先进的技术对此进行深入研究,为临床应用中药熏蒸治疗脑卒中偏瘫的机理提供循证依据,对推广中医药治疗脑卒中的康复技术具有重要意义。
  参考文献
  [1]中华医学会神经病学分会脑血管病学组急性缺血性脑卒中诊治指南撰写组.中国急性缺血性脑卒中诊治指南2010[J].中国全科医学,2011,14(35):40134017.
  [2]谢青.脑卒中的康复治疗现状[J].内科理论与实践,2012,7(2):8690.
  [3]李旭,刘庆山.抗脑卒中药物的研究进展[J].中央民族大学学报(自然科学版),2013,22(1):5659.
  [4]刘庆山,方亮,王维群,等.基于神经血管单元和网络药理学理论的抗脑卒中神经病变靶点分析[J].中国中药杂志,2012,37(2):138141.
  [5]吴向梅,宁智飞,叶虹,等.补阳还五汤结合rtPA静脉溶栓治疗急性脑梗死患者近、远期疗效[J].广州中医药大学学报,2016,33(6):778781.
  [6]杨湘英,徐雯.脑卒中康复期患者下尿路症状发生情况及危险因素分析[J].中国康复医学杂志,2012,27(11):10461048.

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