4）血清硫化氢及各血管活性物质的含量测定

　　血清中血管活性物质（组胺、p物质）的含量测定采用酶联免疫吸附（elisa）法 ，硫化氢采用比色法测定，操作均按照说明书进行。分别记录每时相点检测血清中各个因子含量 ，比较 各组大 鼠血 清 中硫化氢及c—反应蛋白、il—6、总体抗氧化能力的含量变化。

　　3.统计学处理方法

　　采用 spss17.0统计软件进行统计分析。计数资料用例数及百分数表示，计量资料以均数 ±标准差（ ±s）表示。率的比较采用卡方检验；不同时相点下各组间均数比较采用方差分析，两组间均数的比较采用 lsd检验；同一时相点两组间比较采用 t 检验 。以 p<0.05表示差异具有统计学意义标准。

　　五、实施计划进度

　　XX.9———XX.10 文献资料的检索、课题预调查、撰写综述。

　　XX.10———XX.11 药物置备、动物购买、预实验及撰写开题报告。

　　XX.11———XX.1 动物实验研究。

　　XX. 1——XX.2 实验指标检测及数据整理统计、撰写论文。

　　XX. 2——XX. 4 完成论文，审查论文。

　　六、预期研究成果

　　预期结果及其意义：

　　通过对大鼠烧伤后给予外源性气体信号分子硫化氢（h2s）前后血清血管活性物质（组胺、p物质）和大鼠心率、血压动态变化的对比，表明h2s参与了烧伤休克早期应激的病理生理过程，并有一定的抗休克作用。为严重烧伤早期休克的病理生理变化引入新的理论机制，为烧伤抗炎治疗寻找新的研究方向。

　　七、估算课题工作量、完成课题的条件

　　1、仪器设备、人员配备、实验动物、药物试剂等：

　　（1）仪器设备：

　　95℃恒温水浴箱；

　　高转速离心机；

　　16道生理指标测量仪；

　　敏感硫电极；

　　722光栅分光光度计；

　　酶标仪。

　　（2）人员配置：

　　符合条件的实验室及相关技术人员的指导和协助。

　　（3）实验动物

　　健康雄性sd大鼠78只，体重200～250 g，青海省地方病疾病控制中心选购。

　　（4）药物试剂

　　硫氢化钠（nahs）注射液；ld—炔丙基甘氨酸（ppg）注射液；乌拉坦麻醉剂；大鼠组胺（his）酶联免疫分析试剂盒；大鼠p物质（sp）酶联免疫分析试剂盒；抗坏血酸（c6h8o6）；氢氧化钠（naoh）；乙二胺四乙酸二钠（edta）；na2s·9h2o；l—半胱氨酸；5’—磷酸吡哆醛；磷酸二氢钾；磷酸氢二钾；三氯乙酸；三氯化铁；醋酸锌；对氨基二甲基对苯二胺盐酸盐

　　2、开展科学研究的经费

　　项 目经费支出（元）备 注（依据与说明）

　　一、研究经费

　　1、科研业务费

　　（1）测试/计算/分析费

　　（2）能源/动力费1000

　　（3）会议/差旅费

　　（4）出版物/文献信息费500

　　2、实验材料费

　　（1）原材料/试剂/分析费2650两个个试剂盒2200元；麻醉剂450元

　　（2）其他4160实验大鼠、笼具及饲料

　　3、仪器设备

　　（1）购置

　　（2）试剂

　　4、实验室改装费

　　二、劳务费

　　三、合计8310

　　八、存在的问题及解决的办法措施

　　1、 预计研究过程中可能遇到的困难和问题：

　　1）研究经费不足；

　　2）试剂质量问题；

　　2）缺少相应的实验设备；

　　3）专业实验经验不足；

　　4）动物饲养过程及实验过程中可能出现的误差；

　　5）不可预知的问题。

　　2、解决的办法和措施：

　　1）尽量节省开支及向导师申请资金。

　　2）严格按照动物饲养要求，每组多预备一只。

　　3）严格按照文献记载造模并进行预实验；力争掌握成熟的实验操作方法，并可寻求有经验的实验技术人员的指导。

　　4）完善实验前期的准备工作，参阅相关文献资料，找到相关的理论依据。

　　5）操作过程力求规范，检测设立标准质控，尽量选同一批号的试剂，药物。

　　6）向公卫系及高原实验中心寻借仪器。

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