1仪器与试药
高效液相色谱仪:岛津LC-10ATvp泵,SPD-10Avp紫外检测器,威玛龙色谱工作站,BUG25-12超声波清洗机(上海必能信超声波有限公司)。复方金蒲片;延胡索乙素对照品(中国药品生物制品检定所)。甲醇为色谱纯;其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.2溶液的配制
2.2.1对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品10.9mg,加甲醇溶解,并置50mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,作为对照品储备液。吸取对照品储备液25mL置50mL容量瓶中,制成每1mL含0.109mg的溶液,作为对照品溶液。
2.2.2供试品溶液的制备取复方金蒲片20片,去除糖衣,研细,精密称定,取1g,精密称定,置50mL离心管中,加甲醇10mL,用超声波清洗机(25kHz,500W)超声30min,3000r/min离心10min。倾出上清液,残渣加入甲醇10mL,再超声30min,过滤,滤液与前次上清液合并,置水浴蒸干。残渣加水10mL使溶解,加稀盐酸调至pH2,移至分液漏斗,加乙醚提取2次,每次10mL。弃去乙醚层,水层加入氨试液调至pH10,移至分液漏斗,加乙醚提取2次,每次10mL。弃去水层,合并乙醚层,置水浴上蒸干,残渣加甲醇使溶解,并转移至5mL容量瓶中,稀释至刻度,摇匀,滤过,作为供试品溶液。
2.4精密度试验
取同一对照品溶液(每1mL含0.109mg延胡索乙素)进行日内和日间精密度试验,测定其峰面积,计算日内RSD=1.56%(n=6),日间RSD=1.77%(n=3)。
2.5重复性试验
取同一批供试品,按含量测定方法重复测定,计算RSD=1.70%(n=5),表明本法重复性较好。
2.6稳定性试验
另取供试品溶液,自配制后分别在0、2、4、8、12、24h测定峰面积,RSD=1.61%,表明该溶液在24h内稳定。精密取同一批已知延胡索乙素含量的样品粉末约0.6g,分别加入不同量的延胡索乙素对照品,按含量测定方法进行测定,结果见表1。本试验供试品溶液制备考察了回流提取和超声提取2种方法,均用甲醇作为提取溶剂,结果回流提取延胡索乙素的含量比超声法提取略低,所以选用了操作简单的超声法作为提取方法。在超声提取次数的考察中,我们发现,提取1、2、3次延胡索乙素的.含量分别为每片1.86、2.18、2.19mg,可见提取2次和提取3次没有太大的差别,故将提取次数确定为2次。由于延胡索乙素为异喹啉类生物碱,易溶于酸,在碱性溶液中呈游离状,故采用“酸溶解碱沉淀”的方法进行精制,既提高了延胡索乙素的纯度,又大大减少了杂质对测定的影响。本试验比较了甲醇-磷酸缓冲液、甲醇-乙酸(用氨水调节pH)2种色谱系统,结果后者的分离效果好。
1引导式教学法在教学中的应用
康复医学包含的医学知识理论多,对疾病本质的认识要求高,涉及的疾病范围广,康复技术多样化以及实际操作较复杂等,致使在教学中,教与学双方都存在一定的困难。引导式教学法将传统教学中以教师为中心的模式转变为以学生为中心的模式,结合广泛采用现代多媒体教学设备,将教学内容变成一个个具体而实际的问题,教师在教学时提出解决问题的思路,让学生利用各种信息资源获得解决问题的答案。在问题的引导下,学生围绕已学临床知识进行独立思考,综合归纳演绎,例如,在讲述“小儿脑性瘫痪的康复”这一章节的内容时,教师按教学大纲要求及课堂讲授内容,将此章节按照“是什么”、“为什么会出现这些症状”、“怎样处理和改善”的递进关系,将知识点的重点难点设计成一个个问题,并将授课内容和教学大纲提前发给学生预习此章。授课时通过多媒体展现脑瘫患儿的临床表现,引导学生思考患儿出现临床症状的机理和方法处理。据此,教师提出小儿脑瘫康复的总思路:
①康复评定:包括小儿身体发育、躯体功能、平衡反应、协调能力、站立和步行能力、心理、智力及言语功能评定等;
②估计预后;
③确定康复治疗总目标;
④制定康复治疗的阶段计划与总体计划;
⑤实施具体的治疗计划以及处理这些症状的过程,并多媒体录像和图片演示Bobath法、作业治疗、认知、言语治疗等。通过问题引导,结合多媒体教学,启发学生进行思考,有助于学生对小儿脑瘫这一疾病的发生、发展和转归有一个较为全面而深刻的理解。为了进一步说明引导式教学法和传统式教学法的区别,笔者曾在教学中进行教学实验,将重庆医科大学中医药学院20xx级中医康复专业120名学生按照学号分为传统教学方法组(60名)和引导式教学方法组(60名),在进行言语疗法、运动疗法、物理因子疗法、神经康复技术、肌力增强技术、关节活动技术这六部分内容的教学中,对两组学生分别采用传统教学方法和引导式教学方法,进行对比教学,最后对学生12项指标进行评定。结果表明引导式教学方法组在概念原理的理解、基础知识掌握、理论联系实际方面与传统教学组无显著性差异(P>0.05);而在学生学习兴趣、自学能力、发挥主观能动性、分析归纳能力、实验操作能力、创造性思维能力、综合能力方面与传统教学组有显著性差异(P<0.05)。对我院20xx级中医康复本科两个班124名学生,在讲授“脑卒中的临床康复”一章中,按班级其中一个班采用传统教学方法讲授,另一个采用问题引导式教学方法讲授,将此章节按照“脑卒中的临床表现是什么”、“为什么会出现这些症状”以及“怎样处理”的递进关系,将知识点的重点难点设计成一个个问题,并将授课内容和教学目标设计成多个问题让学生课前预习并分组讨论。引导学生积极思考,并查阅相关基础知识,授课时结合多媒体教学展现脑卒中的临床表现,课后对学生进行问卷调查评估。结果表明问题引导式教学法在学生对基础知识的掌握理解及康复治疗技术的掌握运用方面与传统教学无显著差异(P>0.05)。在自学能力、学习兴趣、分析归纳能力、临床思维能力、综合能力方面与传统教学有显著差异(P<0.05)。说明引导式教学法能较大提高学生的学习兴趣,培养学生的自学能力和临床思维能力,锻炼学生的综合能力。