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柱层析技术在中药材有效成分分离纯化中的应用

时间: 2023-12-23

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  张氏等[10]利用ZB-2强碱性阴离子交换纤维柱层析分离纯化了指天椒中的辣椒碱,在实验最优条件下,将辣椒碱的含量由4.5%提高到92.0%,回收率为72.3%。迟氏等[11]研究表明,强酸性阳离子交换树脂DOWEX 50WX2也能应用于角蒿生物碱的分离纯化。翟氏等[12]利用硅胶柱层析,分离纯化了平贝母的总生物碱。其以薄层层析硅胶G为固定相,乙酸乙酯-甲醇-氨水(17∶2∶1)为流动相,分离得到了贝母素甲和贝母素乙,其纯度分别达到93.19%和92.09%。另外,大孔吸附树脂D101也应用在荷叶生物碱的分离纯化中,其效果强于聚酰胺和HP-20大孔树脂[13]。潘氏等[14]研究显示,采用AB-8型吸附树脂和硅胶柱层析得到了纯度为97.26%和94.18%的长春碱和长春新碱。

  2.3 黄酮

  总黄酮是黄酮类化合物的总称,泛指2个具有酚羟基的苯环(A-环与B-环)通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物,包括黄酮、黄酮醇双氢黄(醇)、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等,是一类很强的抗氧化剂,能够抗癌、防癌、抑菌、抗病毒、保护心血管系统、调节免疫系统功能等[15]。目前分离黄酮类物质常采用离子交换柱层析和吸附柱层析。   肖氏等[16]利用强碱阴离子交换树脂对大豆异黄酮进行了有效的分离纯化。董氏等[17]利用强碱性阴离子交换纤维对银杏叶黄酮的分离纯化进行了参数优化研究。两者研究均发现,在强碱性溶液中,黄酮在层析柱中的吸附效果佳,而强酸性洗脱液洗脱效果好。同样是银杏叶黄酮,傅氏等[18]则利用大孔吸附树脂进行纯化,可获得总黄酮达34.3%的产物。程氏等[19]采用FL-1大孔树脂柱层析,得到纯度为55.22%的番石榴叶总黄酮。而瘤果黑种草子总黄酮提取物经过AB-8大孔树脂和聚酰胺柱层析2次纯化后,总黄酮的纯度为62.2%,且产品回收率高[20]。蒋氏等[21]比较了3种方法在分离纯化木姜叶柯总黄酮中的效果,发现聚酰胺树脂法得到的黄酮含量为70.67%,远高于溶剂萃取法(37.84%)和大孔吸附树脂法(48.64%);进一步研究还发现,80~100目的聚酰胺树脂的吸附量和洗脱率均较高。

  3 结语

  柱层析技术是目前较为先进的分离纯化技术,具有回收率和纯度高、能源消耗和环境污染低等优点,在中药材有效成分的分离纯化方面有广阔的应用前景。对不同中药材和不同有效成分,甚至同一中药材的同一成分,所使用的柱层析技术也呈现出多样化。这不仅体现在柱层析的类型、固定相、流动相的选择,还体现在上样液、上样浓度、洗脱液、流速、温度等技术参数,以及多种层析柱的联合使用上。在实际使用中,应根据特定中药材和有效成分,以及产品的质量要求,优化分离纯化生产工艺技术。

  参考文献

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  [13] 肖文军,胡祥文,胡云铃,等.荷叶生物碱柱分离纯化技术研究[J].食品科学,2007,28(6):120-124.

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