1.3谷氨酰胺转移酶基因重组表达

　　谷氨酰胺转移酶能够改变蛋白质的理化性质，具有重要的实用价值。因此，开发能够用于食品行业的有效的谷氨酰胺转移酶合成系统是很必要的。由Itaya[12]和Kikuchi进行的调查结果表明，目前的谷氨酰胺转移酶大都是利用大肠杆菌菌株生产的。谷氨酰胺转移酶是以酶原的形式存在的，然后通过切除N-端前导肽可以直接生成具有活力的谷氨酰胺转移酶[13]。许多研究表明前导肽是在大肠杆菌中过表达谷氨酰胺转移酶的关键因素[14]，首先把酶的编码基因克隆到大肠杆菌中，然后经过培养后利用层析的方法纯化重组蛋白。利用这种重组大肠杆菌生产的谷氨酰胺转移酶的活力可达到22U/mg[15]。但是同时也应该注意与蛋白质翻译后修饰相关的问题，探究开发更便宜、更有效的生物合成系统，从而降低运输、保存、提取、纯化等有关成本。

　　1.4谷氨酰胺转移酶制剂

　　谷氨酰胺转移酶制剂可以成为解决很多与酶应用效率、食物质地等相关难题的解决途径。市场上有不同的微生物酶制剂，它们含有利用微生物合成的谷氨酰胺转移酶，这些酶可以中和由于冷冻而引起的肉类质地的变化[16];也可以使香肠等肉类产品更快地加工成熟，并且具有良好的口感;它们可以改善肉的质地，使加热和配给过程的损失最小化。Poland公司的酶制剂可以作为发酵乳制品生产过程中的辅助剂，可以提高加工过程中蛋白质的热激能力，并改善成品的风味。利用这种酶制剂已经获得了更高稳定性的奶油、冷凝效果更好的干奶酪。在食品行业使用谷氨酰胺转移酶已成为一种自然的技术方法，并且利用酶法改变食物成分比化学方法更容易被食品行业所接受。

　　二、谷氨酰胺转移酶的应用

　　2.1含有谷氨酰胺转移酶的制剂可以用于食品中蛋白质的交联反应，因此引起了人们的研究兴趣。研究结果表明，交联后的β-酪蛋白比未交联化的酪蛋白对胃蛋白酶的消化作用抵抗性更强，利用这种特性可以开发具有更强的结构特性的食品[17]。在烘焙行业中，谷氨酰胺转移酶主要用于醇溶谷蛋白链之间的交联反应。谷氨酰胺转移酶对面团的稳定性和体积有积极影响，还可以提高利用较差面粉制作的面包的质量，提高其质地[18]。研究发现谷氨酰胺转移酶可以改善面团的流变性，可以保证烘焙后面包内适当的孔隙大小和弹性,与传统方法制作的面包糕点相比，体积增大了14%[19]。此外，还可以改善面团的吸水性和韧性，用来提高面包的风味、质地和体积[20]。谷氨酰胺转移酶也广泛用于肉类产业。

　　2.2谷氨酰胺转移酶可以促进肉块的强劲凝聚力，改善用猪肉、牛肉或禽肉制作的结构单一化香肠的质地，而不需要热处理或添加食盐或磷酸盐。谷氨酰胺转移酶处理过的钠酪蛋白可以取代以往的动物脂肪[21]，制作具有更低的脂肪含量、更高营养价值的.肉制品。谷氨酰胺转移酶的应用为生产高质量的粗碎香肠、维也纳香肠和熏肉创造了新的技术。在乳品行业，为了防止酸奶的脱水收缩作用或使其质地更平滑、稳定性更好，常常在生产过程中使用谷氨酰胺转移酶。用谷氨酰胺转移酶改造后的酪蛋白可以作为生产面霜、冷冻甜点、冰淇淋、牛奶饮料和调料的原料[22]。同时，利用谷氨酰胺转移酶进行牛奶蛋白的聚合反应可以生产蛋白膜，改善奶制品的功能特性[23]。谷氨酰胺转移酶也用于奶酪的生产过程，并且可以提高凝乳的产率。目前常用于生产天然奶酪的酶有凝乳酶和谷氨酰胺转移酶。Cozzolino[24]等对提高奶酪产率和特性的因素进行了调查，结果表明在添加凝乳酶之前就添加谷氨酰胺转移酶可以防止牛奶凝固;而同时添加这两种酶可以明显降低奶酪的抗性和硬度，同时减少乳清中蛋白质和脂肪的含量。

　　2.3目前，谷氨酰胺转移酶越来越频繁地在多个行业中被用作蛋白质修饰酶。例如乳清蛋白经谷氨酰胺转移酶作用后可以用于生产蛋白质膜，这种可食用的蛋白质膜可以涂在新鲜蔬菜和水果表面上，用来延长食品的保质期和新鲜度[25];有观点称，利用谷氨酰胺转移酶这种酶来消除大豆蛋白可能的过敏效应和抗水解性[26];也有人建议也许在将来谷氨酰胺转移酶可以用来在醇溶谷蛋白中重建肽键，阻止T细胞对多肽链的识别作用，从而避免脂泻病的产生[27]。

　　三、总结

　　谷氨酰胺转移酶可以诱导蛋白质之间的交联作用，被广泛地用于食品工业中，其廉价来源——即微生物合成方法的发现，为这种酶的实际应用提供了更多的机会。微生物来源的谷氨酰胺转移酶的广阔适用性也引起了人们对菌株筛选的兴趣，以期利用最廉价的底物获得高活力的酶制剂。为了获得更低成本的酶制剂而进行的微生物研究，也许可以促进易得的产品的开发以及其更大范围的使用。