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医学论文(精选)

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医学论文(精选)

医学论文1

  甘油磷酸胆碱(Glycerophosphatidylcholine,GPC,alpha.GPC)是脂磷脂酰胆碱(PC)分子上的两个脂肪酰基完全被水解掉的产物。药物代谢动力学表明:PC被吸收进入血液循环,分布在各器官,它也是人体内分泌代谢的水溶性小分子物质,能通过血脑屏障,为重要的神经传递质乙酰胆碱(Acetyl—choline)的生物合成前体。根据“胆碱能损伤假说”,老年痴呆症的发病机制(记忆力、认知障碍等)与神经递质乙酰胆碱水平降低密切相关,如果提高脑内乙酰胆碱水平,可以显著改善老年痴呆患者认识功能损伤的症状。有专利报道了甘油磷酸胆碱和茴拉西坦同时服用,可以治疗阿尔茨海默氏症。临床研究表明:GPC治疗脑缺血性中风、阿尔茨海默氏症、多发性脑梗死型痴呆疗效显著。临床用于改善中毒性肝损伤等保肝作用 ;同时,GPC还具有显著的防衰老、降血脂、健脑等多种功效,作为保健品及药物制剂的研究与应用正越来越受到重视。GPC已经在意大利、波兰、韩国、俄罗斯、希腊、智利、巴西等国家上市,可在我国,还处于研发阶段。本试验,采用三氧化二铝脱色法 和硅胶柱层析法 相结合的工艺对甘油磷酸胆碱进行分离纯化,并采用高效液相色谱法对其在强光照射、高温、高湿等条件下的稳定性进行研究,从而为其生产、包装、贮存、制剂研发等提供科学依据。

  1 仪器与试药

  1.1 主要仪器上海民桥精密科学仪器有限公司SL202N型电子天平;长沙湘仪离心机有限公司TGI6一WS台式高速离心机;江苏金坛晶玻实验仪器厂HH一2型恒温水浴锅;美国ALLTECH20xx蒸发光散射检测器,配备单岛津液相LC一10ATVP输液泵,六通阀手动进样,浙江大学N20xx色谱工作站。

  1.2 主要试药GPC粗品由合肥工业大学医学工程学院实验室酶法生产;GPC对照品从意大利Euti.cals S.pA公司购买;GPC产品(批号为100301,100302,100303)由本实验室分离纯化制得。无水乙醇、甲醇、二氯甲烷均为天津四友公司生产的分析纯试剂,乙腈为天津四友公司生产的色谱纯试剂,所用水为超纯水机制备的去离子水;三氧化二铝和硅胶粉均为100—200目,由国药集团生产。

  2 方法与结果

  2.1 甘油磷酸胆碱的层析纯化

  2.1.1 三氧化二铝和硅胶粉的预处理 三氧化二铝的预处理:将三氧化二铝平铺在容器中,于25O℃的烘箱中烘烤4 h待用;硅胶粉的预处理:将硅胶粉平铺在容器中,于105℃的烘箱中烘烤30 min待用。

  2.1.2 三氧化二铝对甘油磷酸胆碱粗品脱色 选择甘油磷酸胆碱与三氧化二铝的质量比为1:10。

  在烧杯中称取实验室制备的甘油磷酸胆碱约10 g,加入无水乙醇约100 mL,置于50℃的恒温水浴锅中保温,搅拌,使得甘油磷酸胆碱完全溶解后,加入约100 g经过预处理的三氧化二铝,搅拌脱色2 h,离心分离,除去下层三氧化二铝。将上层溶液蒸发浓缩除去溶剂,得到塑黄色的甘油磷酸胆碱4.2 g。

  2.1.3 硅胶柱层析法进一步纯化甘油磷酸胆碱称取约210 g经过预处理的硅胶粉,用甲醇溶胀24h后,湿法装柱。将经过三氧化二铝脱色的4.2 g甘油磷酸胆碱产品溶于少量乙醇中,小心的加入层析柱内。缓慢的加入洗脱剂(甲醇:乙醇:氯仿=60:35:15)进行洗脱,分段收集柱下端流出的洗脱液,检测,合并含有甘油磷酸胆碱的洗脱液,蒸发浓缩除去溶剂,得到甘油磷酸胆碱产品。

  2.2 甘油磷酸胆碱的含量测定及稳定性研究

  2.2.1 对照品溶液的制备精密称取意大利Euti.cals S.pA公司的GPC对照品适量,用流动相溶解后,转移至100 mL容量瓶中定容,得到约10 g·L的储备液,冰箱保存备用。

  2.2.2 色谱条件浙江大学N20xx工作站,色谱柱为GraceSmart RP 8柱(250 mm×4.6 Bin,5I,zm),流动相为60% 乙腈一水溶液,流速为0.7mL·min~,柱温为(25-4-1)qC。检测器为美国All—tech 20xx型蒸发光散射检测器,漂移管温度为109% ,载气为空气,气体流速为3.5 mL·min,进样量为20 L。

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